ProNet Biotech: Große Forschung mit Kleinen Hefen | Biomol Blog | Ressourcen

Verfasst von Emily Locke

Saccharomyces cerevisiae ist nicht nur für das Backen von Brot oder das Brauen von Bier wichtig – sondern auch für die Forschung. Sie findet in fast jedem molekularbiologischen Labor Anwendung als Modellorganismus und ist auch in der Industrie als Medikamenten- und Rohstoffproduzent nicht mehr wegzudenken [1]. Im Jahr 2022 wurde die Backhefe von der Vereinigung für Allgemeine und Angewandte Mikrobiologie (VAAM) sogar zur „Mikrobe des Jahres“ gekürt. Doch was macht den kleinen Pilz so besonders? Anders als beim Modellorganismus Escherichia coli handelt es sich bei S. cerevisiae um einen Eukaryoten. Damit ähnelt das Gen- und Proteinexpressionssystem der Hefe eher dem von Pflanzen- und Tierzellen [2]. Dazu gehören Prozesse wie Glykosylierung, die Bildung von Disulfidbrücken und posttranslationale Modifikationen [3].

Zusätzlich zu der Verwandtschaft der internen Zellstruktur zu anderen eukaryotischen Zellen lassen sich die unterschiedlichen Hefestämme sehr einfach und günstig in Kultur halten – und runden damit ihre Performance als perfekter Modellorganismus für die Forschung ab [2]. Unser neuer Hersteller ProNet Biotech hat das große Potenzial der Hefe erkannt und sich zum Ziel gesetzt, die Hefetechnologie mit innovativen Produkten zu unterstützen und zu stärken. Biomol freut sich sehr, durch die Zusammenarbeit mit ProNet Biotech die Hefe als wertvolles Forschungswerkzeug für Wissenschaftler*innen verfügbar zu machen!

Diese Themen warten auf Sie:

1) ProNet Biotech – Ihr Experte für Hefetechnologien

2) Erstklassige Kits für molekularbiologische Untersuchungen in Hefen

3) Top-Produkte von ProNet Biotech

4) Y2H – Das Hefe-Zwei-Hybrid-System

Jetzt kostenlos für den Biomol-Newsletter anmelden und keinen Blog-Artikel mehr verpassen!

ProNet Biotech – Ihr Experte für Hefetechnologien

ProNet Biotech konzentriert sich auf die Forschung und Entwicklung im Bereich der molekularen Hefebiotechnologie mit dem Ziel, die Transformation von der wissenschaftlichen Forschung zur industriellen Anwendung zu beschleunigen. Das Unternehmen wurde 2019 mit dem chinesischen Namen Nanjing Ruiyuan Biotechnology gegründet und hat seinen Sitz in der Stadt Nanjing, China. Dort besitzt es im Jiangsu Life Science Technology Innovation Park eine F&E-Produktionsstätte mit einer Fläche von 3.500 m² und einem hochmodern ausgestatteten Labor mit biologischer Sicherheitsstufe 3. Hier arbeitet ein erfahrenes Team an der Entwicklung innovativer Hefe-Technologieplattformen, die Wissenschaftler*innen weltweit in der Grundlagenforschung, in den Agrarwissenschaften oder in der Pflanzenforschung unterstützen [3].

Erstklassige Kits für molekularbiologische Untersuchungen in Hefen

Das Sortiment von ProNet Biotech umfasst eine Reihe an hochwertigen Kits, unter anderem für das Amplifizieren von Fragmenten des Hefegenoms, das Exprimieren von rekombinanten Proteinen in Hefen oder das Screening auf abiotische Stressresistenzgene. Außerdem bietet das chinesische Unternehmen erstklassige Plattformen für Hefe-Ein-, -Zwei- und -Drei-Hybrid-Systeme an. Beim Hefe-Ein-Hybrid-System, kurz Y1H, handelt es sich um eine biochemische Technik zur Identifizierung von Protein-DNA-Interaktionen. Mit dem Hefe-Zwei-Hybrid-System, oder Y2H, können Protein-Protein-Interaktionen aufgedeckt und mit dem Hefe-Drei-Hybrid-System Y3H komplexere makromolekulare Wechselwirkungen zwischen drei verschiedenen Komponenten untersucht werden [3]. ProNet Biotech bietet das Y1H als Gen- oder Transkriptionsfaktor-zentriertes System, das Y2H als Zellkern- oder Membransystem und das Y3H als nukleares System an.

***Top-Produkte von ProNet Biotech***
*Klonierungs- und Expressionskits*
Yeast Colony Rapid Detection Kit	PNB-RY8001-01
Yeast One Hybrid (Gene-centered) Vector Kit	PNB-RY8009
Yeast One Hybrid (TF-centered) Vector Kit	PNB-RY8012
Yeast Two-Hybrid (Nuclear System) Vector Kit	PNB-RY8008
Yeast Two-Hybrid (Membrane System) Vector Kit	PNB-RY8010
Yeast Three-Hybrid (Nuclear System) Vector Kit	PNB-RY8011

Alle Produkte von ProNet Biotech

Y2H – Das Hefe-Zwei-Hybrid-System

Doch wie genau funktionieren die Hybrid-Systeme? Nehmen wir das Prinzip hinter dem Y2H-System einmal genauer unter die Lupe: Die molekulare Grundlage bildet der Transkriptionsfaktor GAL4, ein zur Genregulation benötigtes Protein in der Hefe. GAL4 besitzt zwei Domänen, die Bindedomäne GAL4-BD, mit der es an die DNA binden kann, und die Aktivierungsdomäne GAL4-AD, welche die Transkription aktiviert (Abb. 1) [4]. Diese beiden Domänen werden voneinander getrennt und unter Verwendung besonderer Klonierungsvektoren jeweils mit einem der zu untersuchenden Proteine fusioniert [5].

Y2H_Principle

Abbildung 1: Das Prinzip hinter dem nuklearen Hefe-Zwei-Hybrid-System. Die Interaktion zwischen dem Bait- und dem Prey-Fusionsprotein bringt die Bindedomäne (BD) und die Aktivierungsdomäne (AD) des Transkriptionsfaktors GAL4 in räumliche Nähe. Durch die funktionelle Rekonstitution von GAL4 wird ein nachgeschaltetes Reportergen aktiviert, was einen Nachweis der Protein-Protein-Interaktion ermöglicht [3].

Das Fusionsprotein, das aus GAL4-BD und der Aminosäuresequenz besteht, für die ein potentieller Bindungspartner gefunden werden soll, wird Köderprotein oder Bait genannt. Das Hybridprotein aus der GAL4-AD und dem möglichen Bindepartner für das Bait-Protein heißt Beuteprotein oder Prey [4]. Kommt es zu Wechselwirkungen zwischen dem Bait- und dem Prey-Protein, werden die beiden Transkriptionsfaktor-Domänen BD und AD in unmittelbare Nähe zueinander gebracht, woraufhin sie ein im Hefestamm vorhandenes Reportergen aktivieren können (Abb. 1) [5]. Die Expression des Reportergens kann durch Wachstum auf entsprechenden Selektionsmedien nachgewiesen und dadurch die untersuchte Protein-Protein-Interaktion aufgeklärt werden [4].