Ihre Fragen beantwortet von den Experten von PurSolutions.
Fragen zu Tubulin:
Was ist der Unterschied zwischen Cycled Tubulin und lyophilisiertem Tubulin?
Cycled Tubulin und lyophilisiertes Tubulin unterscheiden sich in der verwendeten Isolationsmethode sowie den empfohlenen Lagerbedingungen und damit auch im Preis. Lyophilisiertes Tubulin wird durch selektive Präzipitation isoliert und anschließend direkt lyophilisiert. Cycled Tubulin durchläuft hingegen mehrere aufeinander folgende Polymerisations- und Depolymerisationszyklen und wird anschließend kryokonserviert. Generell empfehlen wir bei Fluoreszenz-basierten Methoden die Verwendung von Cycled Tubulin und bei Turbiditäts-basierten Anwendungen die Verwendung von lyophilisiertem Tubulin. Beide Produkte wurden aus Rinderhirnen isoliert und besitzen eine garantierte Reinheit von >99%.
Wie wird Cycled Tubulin hergestellt?
Cycled Tubulin wird durch zwei Polymerisations- und Depolymerisationszyklen isoliert. Alle “gelabelten” Tubulin-Produkte von PurSolutions basieren auf Cycled Tubulin und durchlaufen während des Labeling-Prozesses zwei weitere Polymerisations- und Depolymerisationszyklen. Lyophilisiertes Tubulin von PurSolutions hingegen wird durch selektive Präzipitation isoliert und besteht daher aus anderen Tubulin-Isotypen als Cycled Tubulin.
Was ist bei der Lagerung und Handhabung der Tubulin-Produkte zu beachten?
Der Versand kryokonservierter Reagenzien wie Cycled Tubulin und Labeled Tubulin erfolgt mit Trockeneis, die Lagerung bei -80 °C. Kurz vor Benutzung können Sie die Reagenzien kurz in 37 °C warmem Wasser auftauen. Nach dem Auftauen sollte das Tubulin so bald wie möglich wieder auf Eis gelagert werden. Es wird davon abgeraten das Produkt mehrmals wieder einzufrieren/aufzutauen. (Weitere Informationen finden sich weiter unten.) Lyophilisiertes Tubulin wird ohne Kühlung und bei normaler Luftfeuchtigkeit versendet. Nach der Rekonstitution der Tubulin-Lösung sollte diese auf Eis aufbewahrt werden. Beachten Sie, dass PurSolutions lyophilisierte Produkte ein Protein-zu-Pulver Verhältnis von 1:2 aufweisen (d.h. 1 mg Tubulin = 3 mg Pulver). Ausführliche Lager- und Handhabungshinweise sind jeder Lieferung beigefügt.
Darf ich Tubulin-Produkte mehrmals auftauen/einfrieren?
Kryokonservierte Produkte vertragen einen Einfrier/Auftau-Zyklus ohne signifikante Aktivitätsänderungen, von weiteren ist allerdings abzusehen. Wir empfehlen Ihnen daher das Produkt direkt nach der Lieferung aufzutauen (37°C Wasserbad, anschließend auf Eis), in passende Größen zu aliquotieren und die Aliquots anschließend in flüssigem Stickstoff einzufrieren und bei -80°C zu lagern.
Was sind typische Anwendungsgebiete von Tubulin-Produkten?
Reines Tubulin hat eine Vielzahl experimenteller Anwendungen, zum Beispiel bei der Strukturanalyse mittels Röntgenkristallographie oder Elektronenmikroskopie, der Hochdurchsatzanalyse von Wirkstoffkandidaten oder bei biochemischen und biophysikalischen in vitro-Assays. Häufig verwendete und bewährte Protokolle finden sich zum Download auf der Website von PurSolutions.
Warum bieten Sie Fluorophor-markiertes Tubulin mit verschiedenen Fluoreszenzfarbstoffen an?
In Abhängigkeit von dem individuellen Experiment und dem vorhandenen Mikroskopie-System benötigen manche Nutzer ein spezifisches spektroskopisches Profil ihrer Tubuline. Manche Experimente basieren zudem auf der Verwendung verschiedenfarbig-markierter Tubuline. Ein bekanntes Beispiel wäre die Generierung Polaritäts-markierter Mikrotubuli.
Wie hoch ist die Labeling-Stöchiometrie der markierten Tubulin-Produkte?
PurSolutions garantiert Ihnen eine Labeling-Stöchiometrie ([Farbstoffmolekül]/[Tubulin]) zwischen 0,5 und 1,5. Die spezifische Labeling-Stöchiometrie wird spektroskopisch ermittelt und ist auf dem Produktetikett angegeben.
Fragen zu Aktin:
Wie unterscheiden sich Ultra-Pure Actin und Pure Actin?
Ultra-Pure Actin und Pure Actin unterscheiden sich in ihrer Reinheit und ihrem Preis. Beide Produkte werden aus den Skelettmuskeln von Hasen mit einer adaptierten Methode von Spudich und Watt (1971) isoliert. Die Lyophilisierung erfolgt nach einem angepassten Protokoll von Dráberová et al. (2010). Ultra-Pure Actin hat eine Reinheit von >99% und ist >90% aktiv, während Pure Actin eine Reinheit von >90% besitzt und eine Aktivität von >80% aufweist. Die Aktivität wurde mit Hilfe eines Pelletierungsassays bestimmt.
Was ist bei der Lagerung und Handhabung von Aktin-Produkten zu beachten?
PurSolutions Aktin Produkte werden ohne Kühlung und bei normaler Luftfeuchtigkeit versendet. Sie sollten nach der Rekonstitution sofort auf Eis gelagert werden. Bitte beachten Sie, dass lyophilisierte Produkte ein Protein-zu-Pulver Verhältnis von 1:2 aufweisen (d.h. 1 mg Aktin = 3 mg Pulver). Ausführliche Lager- und Handhabungshinweise sind jeder Lieferung beigefügt.
Was sind typische Anwendungsgebiete für Aktin-Produkte?
Reines Aktin hat eine Vielzahl experimenteller Anwendungen, zum Beispiel bei der Strukturanalyse via Röntgenkristallografie oder Elektronenmikroskopie, der Hochdurchsatzanalyse von Wirkstoffkandidaten oder biochemischen und biophysikalischen in vitro-Assays. Häufig verwendete und bewährte Protokolle finden sich zum Download auf der Website von PurSolutions.
Allgemeine Fragen:
Wie unterscheidet sich PurSolutions von der Konkurrenz?
Es gibt zwei grundlegende Prinzipien, die PurSolutions von den meisten anderen Konkurrenzfirmen abgrenzen. Dadurch, dass sich PurSolutions auf die Herstellung von Tubulin und Aktin-Produkten konzentriert, verfügen ihre Reagenzien über höchste Reinheit, Aktivität und vor allem Uniformität von Charge zu Charge. Der zweite Faktor ist PurSolutions Fähigkeit auch individuelle Anfragen einzelner Kunden zu bearbeiten und ihnen so ein maßgeschneidertes Produkt zu liefern. Mit zuverlässigen Produkten und hervorragendem Kundenservice möchte PurSolutions die zellbiologische und pharmazeutische Forschung vorantreiben und unterstützen.